凝胶电泳是分析复杂蛋白质混合物、分析某一蛋白质或者多肽相对含量的一种常用方法，是一种检测蛋白质纯度、评估蛋白质分子量的强有力的生化分析方法。在该电泳系统中，条带染色是一个重要的步骤。因为它直接关系到试验结果能否使用。目前，电泳后蛋白质染色的方法主要有考马斯亮兰、银染、荧光索染色法等。近几年，许多研究者对染色方法进行了改进，灵敏度和检测范围都比以前大大提高。现主要对博士德生物在凝胶电泳后蛋白质条带染色技术方面所取得的进展进行总结。
1. 考马斯亮蓝蛋白质染色试剂盒
考马斯亮兰染色目前广泛运用的是考马斯亮兰R-250。其原理是利用考马斯亮兰分子上的芳香苯环，与蛋白质的疏水区结合；同时其亚硫酸基团（-SO32--）与蛋白质的正电荷结合，可使蛋白质染出兰色条带。该法简单、快速，是蛋白质电泳检测和定量分析常用的一种方法。但是该方法灵敏度相对不高，检测下限为10ng ，背景较高。而且该方法染色强度依赖于蛋白质的特性，碱性蛋白质、低分子量蛋白质在醇、酸固定时，容易从凝胶中洗脱下来。
产品概览
电泳完毕需通过染色和脱色评定其结果的优劣。对凝胶中分离成不同条带的蛋白进行检测。此外，根
据不同的研究目的，也可将凝胶电印迹。考马斯亮蓝染色液(Commassie Blue Fast Staining Solution)是以考马斯亮蓝R250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性 PAGE蛋白电泳胶的快速染色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测.可以检测到低达10ng的蛋白电泳条带.本染色液呈酸性,有轻微腐蚀性,使用时请作必要防护。
产品信息：
目录号    产品名称    规格
AR0140    考马斯亮蓝蛋白质染色试剂盒
包括：
染色液
脱色液    Kit

100ml
100ml

     （图a）
2.  快速考马斯亮蓝蛋白质染色试剂盒
    快速考马斯亮兰染色是一种运用考马斯亮兰G-250。考马斯亮蓝（Coomassie brilliant blue，CBB G-250）的化学名称为二甲花青亮蓝，偏酸性，与蛋白质的碱性基团结合，颜色由棕黄色转为深兰色。考马斯亮蓝染色法可以达到微克级检测水平，着色程度与蛋白量的线性动力学相关范围广，适合定量分析。该法由于较低的成本、使用方便及与下游的质谱鉴定技术的良好相容性，而得到了非常广泛的使用
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特点：
•即开即用，无须配制。
•快速简单: 1小时染色，1小时脱色。
•无须甲醇/乙酸脱色，去离子水脱色。
•低背景。
•高灵敏度
产品信息：
目录号    产品名称    规格
AR0170    快速考马斯亮蓝蛋白质染色试剂盒    100ml

   （图b）
3. 蛋白质银染检测试剂盒
银染是迄今为止灵敏度最高的一种染色法。是对SDS—PAGE凝胶中的蛋白质进行染色时最常用的方法，其基本原理是银离子与蛋白质分子上的酸基(COO-)结合，然后银离子被还原为自由的银，可使蛋白质条带呈现深棕至黑色。银染基本上可以分为酸性和碱性2种方法。碱性方法非常敏感，但是需要较长的步骤。酸性方法快速但是灵敏度较低。银染的优点在于灵敏度高，其缺点在于：（1）可能造成很高的背景，特别在水不够纯的情况下；（2）费时费力（需要8～16h）；（3）费用昂贵；（4）需要接触有毒的甲醛，而且，核酸、脂多糖、脂类、醣脂类化合物常会对银染染色的结果进行干扰。
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银染是比考马斯亮蓝染色更灵敏的一种，它是通过银离子（Ag+）在蛋白质上被还原成金属银形成黑色来指示蛋白区带的。银染可以直接进行也可以在主要的蛋白条带通过考马斯亮蓝染色分辨，而细小的考马斯亮蓝染色检测不到的蛋白带色后进行凝胶银染检测。银染的灵敏度比考马斯亮蓝染色高，可以检测低于4 ng的蛋白质。

产品信息：
目录号    产品名称及描述    规格
AR0171    蛋白质银染检测试剂盒    Kit


 （图c）
    4 总结
     对凝胶中分离的蛋白质条带进行染色是蛋白质凝胶分析中的一个重要步骤。围绕染色方法的改进主要集中在如何提高蛋白质染色的灵敏度，操作方便与否，费用是否昂贵等方面。虽然人们已经进行了不懈努力，但是目前的蛋白质染色方法仍然存在着许多期待改善的地方。
     从蛋白质检测的灵敏性、质谱兼容性、操作的简便性等角度，比较了普通考马斯亮蓝染色法、快速考马斯亮蓝染色法和银染法3种蛋白质着色法对凝胶分离蛋白质的检测影响，结果显示，银染检测灵敏度最高，但质谱鉴定相容性差；快速考马斯亮蓝染色法检测灵敏度也高，可达7.8 ng。结论：快速考马斯亮蓝染色法的蛋白质检测灵敏度高，与质谱兼容好，能满足蛋白质组研究需要。
 3种染色法的蛋白质检测灵敏性分析
     BSA的上样量（如上图箭头所示）依次分别为1mg/ml、0.5 mg/ml、0.25 mg/ml、125ng/ml、62.5 ng/ml、31.25 ng/ml、15.6 ng/ml、7.8 ng/ml、3.9 ng/ml、1.95 ng/ml。经普通考马斯亮蓝染色后的条带在15.6 ng水平隐约可见（图a）；而快速考马斯亮蓝染色法的灵敏度稍高，15.6 ng条带明显可见，在7.8 ng水平隐约可见条带的显示（图b）；而银染法灵敏度最高，在7.8 ng水平可见清晰条带的显现，同时在3.9 ng可见隐约条带（图c）。3种染色法的比较显示，灵敏度最高的是银染法，可达纳克级水平，其次为快速考马斯亮蓝染色法10纳克级蛋白质能被检测。而普通考马斯亮蓝染色法稍差，检测水平仅达几十纳克。
    
 3种染色法的可操作性比较
     在比较其蛋白质检测灵敏性的同时，对染色法的操作简便性、安全性以及蛋白质经质谱鉴定的成功率也作了对比。比较显示，普通考马斯亮蓝染方法简便，但耗时较长。快速考马斯亮蓝染色法可以做到无毒操作，方法简便，耗时短，质谱兼容性较高。银染步骤繁多，但耗时短；操作过程中有甲醇、甲醛等毒性物的接触，质谱兼容性低，不及考马斯亮蓝染色。
    
 3种染色法的操作的安全性与简便性
     由于有机溶剂的相似作用，我们在改进的快速考马斯亮蓝染色法里，抛弃有毒的甲醇及气味难闻的乙酸，同时在步骤上，我们采用染色和固定一步法进行，减少了第一步固定的时间，仅用超纯水清洗，缩短了整个染色及人与有毒物接触的时间。结果显示，改进的快速考马斯亮蓝染色法获得的图像背景不比普通考马斯亮蓝染色法差。
     通过我们的摸索及比较分析认为，用改进的快速考马斯亮蓝染色法能获得低背景、高灵敏度、兼容质谱的蛋白质显示，能为蛋白质组研究、双向凝胶电泳技术的蛋白质分析提供质量的保证。