温度是生化实验中的一项重要因素。在冬季，由于气温大幅下降，而较低的温度则会对生化反应（免疫组织化学、原为杂交等）产生较大影响。此时，就需要对常规的实验条件进行微调，以得到更好地实验结果。

·首先保证试剂孵育温度，最好在37℃的恒温箱进行。

·适当延长试剂孵育时间，一抗可先在37℃中孵育30min，然后在转入冰箱4℃过夜；封闭和二抗等孵育可以由20-30分钟延长至30-40分钟。

·在洗涤过程中，最好用温热的洗涤缓冲液（用微波炉加热），并可适当增加洗涤次数，以去除非特异性结合。

·最后在低温环境的显色过程中，可提前配制DAB显色液或提高显色液浓度，来增强显色效果。

                                                                                                         武汉博士德生物工程有限公司技术部